分离纯化核酸时的注意事项: 防止物理因素的降解: 1.尽量简化操作步骤,缩短提取时间,以减少变性机会。 2.防止热变性,避免高温。一般0-4℃。 3.防止机械剪切作用 动作轻缓;…
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实验步骤 一、试剂配制 1. 5×TBE缓冲液:450 mmol/L Tris-硼酸,10 mmol/L EDTA,pH值8.0。使用时将上述储存液稀释10倍至0.5×TBE缓冲…
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到…
一、DNA酶切反应 1、将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使…
一、材料 λDNA: 购买或自行提取纯化; 重组pBS质料或pUC19质粒; EcoRI酶及其酶切缓冲液: 购买成品; HindⅢ酶及其酶切缓冲液: 购买成品;琼脂糖(Agaros…
一. DNA的限制性内切酶酶切分析 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白…
1)探针变性 将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。 2)标本变性 ①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。…
实验用具及材料 相关溶液的配制 1)20×SSC:175.3g NaCl,88.2g柠檬酸钠,加水至1000mL(用10mol/L NaOH调pH 至7.0)。 2)去离子甲酰胺(…
实验原理 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交…
Cancer Res:重庆大学学者揭示YY1促进癌细胞增殖的新机制
Cell:突破!科学家利用新型基因条形码技术鉴别出关键的癌症免疫基因
mBio:利用噬菌体递送CRISPR-Cas3有望治疗艰难梭菌感染
Mol Biol Evol:揭示精子生成过程中特异性高表达的miRNA家族进化史