分离纯化核酸时的注意事项: 防止物理因素的降解: 1.尽量简化操作步骤,缩短提取时间,以减少变性机会。 2.防止热变性,避免高温。一般0-4℃。 3.防止机械剪切作用 动作轻缓;…
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实验步骤 一、试剂配制 1. 5×TBE缓冲液:450 mmol/L Tris-硼酸,10 mmol/L EDTA,pH值8.0。使用时将上述储存液稀释10倍至0.5×TBE缓冲…
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到…
一、DNA酶切反应 1、将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使…
一、材料 λDNA: 购买或自行提取纯化; 重组pBS质料或pUC19质粒; EcoRI酶及其酶切缓冲液: 购买成品; HindⅢ酶及其酶切缓冲液: 购买成品;琼脂糖(Agaros…
一. DNA的限制性内切酶酶切分析 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白…
1)探针变性 将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。 2)标本变性 ①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。…
研究揭示拟南芥基因组加倍导致的三维染色质结构及基因表达调控特征
Nature:利用CRISPR让一个靶基因在一天之内经历整个进化过程