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一、RNA抽提注意事项 尽可能无RNA酶的环境下操作，最好有专门场所 耗材的处理： 电泳槽需0.5 M NaOH处理过夜后DEPC水清洗 试管氯仿浸泡处理后DEPC水清洗 枪头和e…
基因技术可给人类巨大的利益，但也给医学、伦理、法律和经济带来巨大冲击。基因检验滥用造成了资源浪费及不必要的医疗纠纷，基因隐私导致用人和保险歧视，但限制基因检验又对基因检验技术的发展…
生化方法 * 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 1.转染前24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养…
原核细胞 *用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建 1.PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段，片段5’端和3’端带有与IPTG诱…
1．分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。 2．苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。…
（一）λgt11 cDNA文库铺平板 宿主细菌制备 1．用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基（Y1088用于噬菌斑杂交，Y1090用于免疫筛选），于37℃…
问：何谓实时荧光聚合酶链反应定量检测? 答：在普通PCR扩增系统中，加入一个与靶基因序列特异互补的双荧光标记探针。5′端标记荧光发射集团，3′端标记荧光淬灭集团，当探针完整时，…
原位杂交组织化学常用试剂及处理 一、杂交前准备 （一）DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。 DEPC即二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），可…
问：何谓连接酶链反应? 答：连接酶链反应(ligase chain reaction, LCR)属于一种探针扩增技术，是依赖靶核苷酸序列的寡核苷酸探针的连接技术。这种方法应用4…
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