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原核细胞 *用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建 1.PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段，片段5’端和3’端带有与IPTG诱…
1．分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。 2．苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。…
（一）λgt11 cDNA文库铺平板 宿主细菌制备 1．用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基（Y1088用于噬菌斑杂交，Y1090用于免疫筛选），于37℃…
问：何谓实时荧光聚合酶链反应定量检测? 答：在普通PCR扩增系统中，加入一个与靶基因序列特异互补的双荧光标记探针。5′端标记荧光发射集团，3′端标记荧光淬灭集团，当探针完整时，…
原位杂交组织化学常用试剂及处理 一、杂交前准备 （一）DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。 DEPC即二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），可…
问：何谓连接酶链反应? 答：连接酶链反应(ligase chain reaction, LCR)属于一种探针扩增技术，是依赖靶核苷酸序列的寡核苷酸探针的连接技术。这种方法应用4…
Western的几点经验 1.用脱脂奶粉封闭的效果不一定比用BSA差,不过我们试过几种奶粉,有一些奶粉不太适合.推荐使用的奶粉:雀巢高钙奶粉,多力精低脂奶粉.一般国产的奶粉的颗粒比…
问：何谓巢式聚合酶链反应? 答：巢式聚合酶链反应(nested polymearse chain reaction, nPCR)也称套式PCR。在这种技术中，首先用一对外引物进…
Northern blot技术 经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛－DMSO的凝胶比…
如果能及时掌控SARS病毒分子进化规律，病情就会有效地得到控制；如果能准确掌控其他分子进化规律，人类的生命将会得到自我最大可能的把握。 安徽师范大学朱国萍教授在美国《科学》杂志…
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