目录1.牙刷和血液提取的dna一样吗2.
血液dna提取试剂盒
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血液提取dna的原理及步骤
4.
为什么老叶dna不好提取
5.
牙刷可以做DNA吗
1.牙刷和血液提取的dna一样吗
牙刷上比较多的是细菌，能够获得到的人的口腔上皮细胞比较少，所以提取出来的DNA很多是细菌的DNA，人的只占很少一部分
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血液dna提取试剂盒
血清/血浆DNA提取试剂盒浓度跟样本量、洗脱体积有关，一般来说用Qiagen、BIOG方法得率都差不多，50微升洗脱体积可以用Qbit测到5-20ng/ul的读数，浓度稍低也没关系，关键还是看pcr检测结果，毕竟浓度太低测到的读书也没有参考意义，还是要以pcr检测结果为准。
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血液提取dna的原理及步骤
血中DNA的提取血液中DNA提取的原理：如果以外周血为DNA提取材料，在外周血中提取DNA就是从有核的白细胞中提取DNA。因此，从外周血中提取DNA包括以下几个关键步骤：第一，破坏红细胞，通常利用红细胞与白细胞膜结构的差异，先使红细胞裂解，经离心后收集白细胞；第二，白细胞裂解：使膜蛋白和核蛋白变性，游离DNA，通常是采用离子型表面活性剂使蛋白质变性；第三，除去变性蛋白质：通常采用蛋白沉淀剂沉淀变性蛋白质，使DNA留在上清液中；第四，在高盐环境下使DNA从有机溶剂如无水乙醇中析出。取材 取外周血5ml，EDTA抗凝1.新鲜抗凝血，离心弃去上清液； 2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml细胞压积加入6-10ml裂解液），轻轻吹打混匀；红细胞裂解液ELS配方：NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml;Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌,用时加10-20ml3.800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液； 4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次； 5.如裂解不完全可重复步骤2和3；6.重悬细胞，用于后续实验；提取DNA，更好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行.酚氯仿方法提取DNA在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。这一方法获得的DNA不仅经酶切后可用于Southern分析，还可用于PCR的模板、文库构建等实验。 原则：（1）防止和抑制DNase对DNA的降解；（2）尽量减少对溶液中DNA的机械剪切破坏。一、试剂准备1．TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。2．TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。3．裂解缓冲液：250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。4．20% SDS 5．2mg/ml蛋白酶K 6．Tris饱和酚（pH 8.0）、酚/氯仿（酚∶氯仿=1∶1）、氯仿7．无水乙醇、75%乙醇二、操作步骤（一）材料处理1．白细胞处理⑴ 取红细胞裂解完全后收集的沉淀，加入0.5ml TE⑵ 将匀浆液转移到1.5ml离心管中。⑶ 加20% SDS 25 μl，蛋白酶K (2mg/ml) 25 μl，混匀。⑷ 60°C水浴1-3hr。2．培养细胞处理：⑴ 将培养细胞悬浮后，用TBS洗涤一次。⑵ 离心4000g×5min，去除上清液。⑶ 加10倍体积的裂解缓冲液。⑷ 50-55°C水浴1-2hr。（二）DNA提取1. 加等体积饱和酚至上述样品处理液中，温和、充分混匀3min。2. 离心5000g×10min，取上层水相到另一1.5ml离心管中。3. 加等体积饱和酚，混匀，离心5000g×10min，取上层水相到另一管中。4. 加等体积酚/氯仿，轻轻混匀，离心5000g×10min，取上层水相到另一管中。如水相仍不澄清，可重复此步骤数次。5. 加等体积氯仿，轻轻混匀，离心5000g×10min，取上层水相到另一管中。6. 加1/10体积的3M醋酸钠（pH 5.2）和2.5倍体积的无水乙醇，轻轻倒置混匀。7. 待絮状物出现后，离心5000g×5min，弃上清液。8. 沉淀用75%乙醇洗涤，离心5000g×3min ，弃上清液。9. 室温下挥发乙醇，待沉淀将近透明后加50-100ml TE溶解过夜。(三）DNA定量和电泳检测1.DNA定量： DNA在260nm处有更大的吸收峰，蛋白质在280nm处有更大的吸收峰，盐和小分子则集中在230nm处。因此，可以用260nm波长进行分光测定DNA浓度，OD值为1相当于大约50μg/ml双链DNA。如用1cm光径，用 H2O稀释DNA样品n倍并以H2O为空白对照，根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度：DNA（mg/ml）=50×OD260读数×稀释倍数/1000。 DNA纯品的OD260/OD280为1.8，故根据OD260/OD280的值可以估计DNA的纯度。若比值较高说明含有RNA，比值较低说明有残余蛋白质存在。OD230/OD260的比值应在0.4-0.5之间，若比值较高说明有残余的盐存在。2.电泳检测： 取1μg**组DNA用行0.8%琼脂糖凝胶上电泳，检测DNA的完整性，或多个样品的浓度是否相同。电泳结束后在点样孔附近应有单一的高分子量条带。三、注意事项1. 所有用品均需要高温高压，以灭活残余的DNA酶。2. 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。3. 用大口滴管或吸头操作，以尽量减少打断DNA的可能性。4. 用上述方法提取的DNA纯度可以满足一般实验（如Southern 杂交、PCR等）目的。如要求更高，可参考有关资料进行DNA纯化。
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为什么老叶dna不好提取
不知是什么植物的叶片，小量法用CATB提取显得繁琐了。看了操作步骤，觉得CATB用冰浴不太合适，因为CATB在温度低于15°C时会结晶析出；其次如果叶片中没有过多多糖，为什么要用醋酸钾。建议：小量法采用SDS法就可以，析出的DNA团，用tip头挑出或低端代沟细玻璃管勾出，就比较纯了，做酶切或分子标记，一般没有问题。还有个原因就是DNA降解，这是操作问题，需要注重操作细节。
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牙刷可以做DNA吗
牙刷可以用作dna鉴定的检材。牙刷是进行亲子鉴定的特殊检材，牙刷是否能做亲子鉴定关键取决于牙刷上是否含有人体口轻脱落细胞。采用dna分型鉴定，如血液(痕)、口腔拭子、毛发等常规样本及烟头、精斑、牙刷等特殊样本都可用作亲子鉴定的检材。
