文： 高慧
尽管临床微生物实验室因新技术的不断出现而发生巨大变化，但作为传统技术的革兰染色仍处于举足轻重的地位，它可先于培养结果、迅速地为临床医生提供潜在病原菌信息，而指导经验治疗。而错误的革兰染色结果会误导临床医生。
鉴于染色过程纯手工操作特性、结果解释的完全主观性，错误的发生不可避免。
Linoj P. Samuel 学者等从美国四大三级医疗中心的微生物实验室收集数据，依据标准准则评估所有非血标本的错误率，目的是建立一个可接受的革兰染色标准检查程序并找出关键改进点。文章发表于近期的 Journal of Clinical Microbiology上。
每个实验室筛选出 976 到 1864 个非血标本的涂片/培养结果，共 6115 个标本，包括呼吸道液体、活检组织、脓液等，这类标本革兰染色为常规培养工作的一部分。
研究者判定染色和培养结果是否矛盾，需依据以下标准：（1）培养检出适中或大量某一种细菌，而涂片未找到相应染色/形态特征的细菌；（2）涂片找到适中或大量细菌，但相应菌的培养结果为阴性。除涂片固定方式不同外，四个实验室革兰染色操作并无很大差异。研究主要关注标本本身质量差、涂片准备过程和涂片结果解释三个因素。
结果发现，染色和培养结果不符合的概率占 5%，其中涂片 Neg/培养 Pos 类型占 58%（153/263）, 涂片 Pos/培养 Neg 占 42%（111/263）。111 例标本中 87 例理论上应该同时做厌氧培养，实际上只有 38 例（44%）做了厌氧培养，但厌氧培养并未培养出任何细菌，可能是厌氧标本的收集、转运和培养过程造成微生物死亡。
1. 在 263 个矛盾标本中，24% 是由于读片错误，但是不同实验室间差异显著，比例在 9%~45% 之间，平均错误发生率为 1.2%，但组间差异差异也是显著的，为 0.4%~2.7%。
2. 假阴性结果占错误读片的 81%，即有一种或多种细菌未被检出，最常漏检的细菌是 G+球菌（28%）和 G-杆菌/球杆菌（19%），最不易漏检的是真菌（8%）。
3. 假阳性仅占错误读片的 19%，主要由被口腔正常菌群污染的呼吸道标本造成，据实验室标准这些标本本该被拒收。
随着健康医疗日趋透明，减少医疗错误而造成的潜在危害已成为主要关注点。如果我们不首先搞清楚医疗错误发生情况，实验室永远不知道该从何处进行改进。对于微生物实验室而言，监控革兰染色错误率是至关重要的第一步。
（责任编辑：xgh）
