水性两相系统实现了一致的多重免疫测定

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一种新颖的检验方法能够同时检测血浆中的多个蛋白,过程只需两小时,从而简化了疾病检测。
 
    该检验能同时准确地测量表示存在疾病的多个生物标记物蛋白,这些疾病包括骨髓移植排异反应时发生的移植物抗宿主病;它不需要清洗步骤,只使用很少量的血浆。
 
    密歇根大学(Ann Arbor, MI, USA)的科学家开发的这种蛋白检验采用了微模式方法。执行测定时,将几微升血浆与聚乙二醇二丙烯酸酯混合,加入定制的384孔微孔板的一个微孔。接下来将右旋糖苷的微滴滴入样本孔的微盆,右旋糖苷微滴中含有抗体结合珠的互补对。在两小时的孵育过程中,血浆中的目标蛋白生物标记物从聚乙二醇二丙烯酸酯的混合状态扩散到右旋糖苷微滴,被抗体结合珠夹在中间。然后在市售的酶标仪上读微孔板。

图片:多相聚合物系统含有独特的抗体结合珠,它以高灵敏度和高特异性与血浆中的蛋白生物标记物结合,从而放大发光信号。来自抗体结合珠的信号强度与血浆中疾病生物标记物的水平成正比(图片蒙World Scientific惠赐)。

   这种无交叉反应的多重测定能在单孔中同时检测细胞上清液中皮摩尔浓度的四种蛋白生物标记物:C-X-C motif配体10 (CXCL10)、CXCL9、干扰素(IL)-8与IL-6。通过检测88名患者慢性移植物抗宿主病(GVHD)的临床症状初显时血浆中的诊断生物标记物(CXCL10和CXCL9),该测定潜在的临床效用得以彰显。
 
    该研究的论文发表于2014年6月2日的《技术》(TECHNOLOGY)杂志。论文的资深作者Shuichi Takayama教授说:“就像油水不相容一样,我们用了两种互不相容的水性溶液。有趣的是,这两种溶液可以排成阵列的模式,而标准的免清洗蛋白检验试剂一般只是在溶液里混合。这一新特性使我们有可能第一次用免洗的检验方法同时测量多个诊断用蛋白质。”
 
    领衔作者Arlyne Simon博士说:“我们相信我们的用户友好、高度准确的平台将被基础医学科学家和临床科学家广泛采用,用于诊断和其它用途。为了使研究实验室和临床化验室更容易采用我们的技术,我们设计了可用市售酶标仪分析的定制微孔板。”

(责任编辑:zqg)

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